ポテトデキストロース寒天(PDA)は、真菌の培養に使用される優れた汎用半固体培地です。キノコ形成種の分離、成長、維持によく使用されます。既製のペトリ皿またはPDAを含む試験管を購入するか、市販のプレミックスを使用してPDAをすばやく作成できます。ただし、簡単で効果的なバージョンをゼロからゼロのコストで作成することは難しくありません。
クレジット:Zedcor完全所有/PhotoObjects.net/Getty Imagesジャガイモ抽出物の調製
ステップ1
約1.2リットルの水道水を入れた鍋にジャガイモを入れ、ストーブで1時間沸騰させます。
ステップ2
鍋を火から下ろし、液体が快適に取り扱えるようになるまで(約10分)冷却します。
ステップ3
液体ポテト抽出物をストレーナーまたはチーズクロスに注ぎ、別の容器に集めます。
培地の準備
ステップ1
ポテト抽出水1リットルにデキストロースと寒天を加えます。
ステップ2
pH試験紙またはpHメーターで溶液のpHをテストします。
ステップ3
pHが6.5を超えている場合は、塩酸溶液を一度に1滴ずつ加えて再テストし、pHを下げます。
ステップ4
pHが6未満の場合、水酸化ナトリウム溶液を一度に1滴ずつ加えて再テストすることにより、pHを調整します。
殺菌
ステップ1
培地を完全に混合し、250 mLの小さなバッチに分けて4つの500 mLフラスコに注ぎます(注:沸騰を防ぐために、各フラスコは半分以上満たしてはなりません)。
ステップ2
ゆるく圧着されたアルミホイルで各フラスコを覆ってください。そうすれば、ホイルは落ちませんが、しっかりとシールされません。
ステップ3
フラスコを圧力鍋に入れます。
ステップ4
メーカーの指示に従って圧力鍋を操作し、PDAを121°C(250°F)で103,421パスカル(15 PSI)の圧力で15分間滅菌します。
ステップ5
圧力鍋の電源を切り、大気圧に戻してから、フラスコを取り外して、取り扱いができるまで冷まします。
媒体を注ぐ
ステップ1
平らな面に滅菌ペトリ皿を並べます。
ステップ2
フラスコが取り扱い温度まで冷却された後、培地が固化し始める前に、片手でフラスコをつかみ、もう一方の手でホイルの蓋を取り外して取っておきます。
ステップ3
ペトリ皿ごとに、片手で蓋を持ち上げ、液体PDAを半分ほどすばやく満たし、蓋を交換します。
ステップ4
ペトリ皿がすべて満たされるまで、上記の手順3を繰り返します。
ステップ5
PDAが残っている場合は、元のホイルの蓋でフラスコをゆるく回収し、冷却して固化させ、ホイルの蓋を締めて冷蔵庫に保管します。